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以下是DNA凝膠電泳中膠塊出現(xiàn)一半白一半黑現(xiàn)象的詳細解析及解決方案:
一、主要原因分析
染色不均勻?
溴化乙錠(EB)或SYBR Green等染料未充分混勻,導致局部過度染色(顯黑色)而其他區(qū)域染色不足(顯白色)?
染色時間不足或染料失效(如Genefinder反復凍融)也可能引發(fā)此現(xiàn)象?
凝膠制備問題?
瓊脂糖溶化時溫度過高或攪拌不均,造成凝膠濃度/厚度不一致?
倒膠過程中混入氣泡或凝固速度不均,影響內部結構均一性?
成像系統(tǒng)故障?
紫外燈光源老化或濾光片波長不匹配,導致顯影亮度不均?
成像儀參數(shù)設置錯誤(如曝光時間或對比度異常)?
二、解決方案
染色步驟優(yōu)化?
染色前渦旋混勻染料,確保溶解無沉淀?
采用新鮮配制的染色液,避光保存避免降解?
制膠標準化操作?
控制溶膠溫度在60-65℃,微波加熱時間歇攪拌?
倒膠前靜置消泡,使用水平臺確保凝膠厚度一致?
設備檢查與校準?
更換紫外燈管或調整成像儀光源均勻性?
通過標準DNA Marker驗證成像系統(tǒng)性能?
三、預防措施
每次實驗前檢查染色劑活性(如用已知濃度DNA測試)?
定期維護電泳設備,更換陳舊緩沖液(推薦0.5×TBE每3次實驗更換)?
BS-300 | 基礎性電泳儀電源 |
BS-600C | 通用型電泳儀電源 |
BS-mini01 | 垂直電泳槽(雙板) |
BS-mini04 | 垂直電泳槽(四板) |
BS-ZY03 | 轉印電泳槽(WB雙板和鉑樂通用) |
BS-ZY04 | 轉印電泳槽 (WB四板) |
BS-sub02 | 瓊脂糖電泳槽 |
注:以上資料僅供參考,具體產品信息請咨詢技術老師或品牌供應商。
DNA凝膠電泳 天津本生一直視質量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經營中始終秉承:遵紀守法,嚴于律己,寬仁以待,敢于承擔的企業(yè)精神作為標準,以過硬的質量和優(yōu)良的服務來維護和拓展市場,較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作,共創(chuàng)美好的未來。
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