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固相載體在ELISA中的作用
固相載體在ELISA中發(fā)揮以下核心作用:
一、提供反應界面
固定生物分子?
通過物理吸附或化學交聯(lián)將抗原/抗體固定在載體表面(如聚苯乙烯微孔板),形成穩(wěn)定的固相化反應界面
維持活性?
載體表面需保持抗原/抗體的免疫學活性,確保后續(xù)特異性結合的有效性
二、分離與純化功能
液相-固相分離?
通過洗滌步驟可選擇性去除未結合的游離成分,僅保留特異性結合的免疫復合物
減少背景干擾?
封閉處理(如BSA封閉)能阻斷載體表面的非特異性結合位點,提高檢測信噪比
三、信號放大基礎
酶反應載體?
固相化的抗原-抗體復合物為酶標二抗提供結合位點,通過酶催化底物顯色實現(xiàn)信號放大
定量檢測平臺?
顏色反應的OD值與目標物濃度成正比,固相載體為酶標儀提供均一的光學檢測平面
四、實驗流程優(yōu)化
標準化操作?
96孔板等標準化設計便于高通量檢測和自動化操作
穩(wěn)定性保障?
固相化處理可使包被的抗原/抗體在4℃保存數(shù)周仍保持活性
注:聚苯乙烯是常用載體材料,因其疏水性表面利于蛋白吸附且透光性良好。
注:以上資料僅供參考,具體請咨詢技術老師或供應商。
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